Auteur(s) :
Abdelwahd
R.,
Gan
Q.,
Udupa
S. M.
...et [al.]
Collectivite(s) Auteur(s) :
Institut National de la Recherche Agronomique
Type : Article
Titre Publication en série :
AL AWAMIA
Année de Publication :
2013
Langue : EN
Collation :
N°127,
20 p.
: ill., réf.
Mots-clés :
CLONAGE ; GÉNÉTIQUE ; LÉGUMINEUSE ; ÉTUDE ;
Gène HVA1 ; Système multisite Gateway ; Vicia Faba L.
Transformation par Agrobacterium tumefaciens est la méthode préférée pour la transformation des légumineuses. Cammunément, les gènes transférés par cette technique sont clonés entre les frontières gauche et droite d'ADN-T (Transferred-DNA) des vecteurs binaires qui se répliquent à la fois dans E. coli et Agrobacterium. Dans cette étude, le nouveau protocole de clonage des gènes d’intérêts "Gateway multisite System " a été utilisé pour insérer une nouvelle construction contenant la séquence HVA1, le promoteur double virus de la mosaïque du chou-fleur (CaMV) 2x35 S et le terminateur Nos dans un vecteur binaire pTF101.GW3. Le vecteur binaire généré pTFGat 101.11 contenant la construction de gène HVA1 a été ensuite introduit dans la souche A. tumefaciens EHA101. En utilisant le protocole de transformation basé sur l'organogenèse directe à partir des noeuds cotylédonaires, nous avons réussi à obtenir 2% des pousses transgéniques de fève qui intègrent la construction de HVA1. Cette intégration a été confirmée par PCR de gène marqueur bar.
N° de la microfiche : 041739