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- Cloning the construct HVA1 into a binary vector by gateway multisite system and genetic transformation of faba bean (vicia faba L.) with HVA1 gene for improving drought tolerance
Cloning the construct HVA1 into a binary vector by gateway multisite system and genetic transformation of faba bean (vicia faba L.) with HVA1 gene for improving drought tolerance
Auteur(s) :
Abdelwahd
R.,
Gan
Q.,
Udupa
S. M.
...et [al.]
Collectivite(s) Auteur(s) :
Institut National de la Recherche Agronomique
Type : Article
Titre Publication en série :
AL AWAMIA
Année de Publication :
2013
Langue : EN
Collation :
N°127,
20 p.
: ill., réf.
Mots-clés :
CLONAGE ; GÉNÉTIQUE ; LÉGUMINEUSE ; ÉTUDE ;
Gène HVA1 ; Système multisite Gateway ; Vicia Faba L.
Résumé/Sommaire :
Transformation par Agrobacterium tumefaciens est la méthode préférée pour la transformation des légumineuses. Cammunément, les gènes transférés par cette technique sont clonés entre les frontières gauche et droite d'ADN-T (Transferred-DNA) des vecteurs binaires qui se répliquent à la fois dans E. coli et Agrobacterium. Dans cette étude, le nouveau protocole de clonage des gènes d’intérêts "Gateway multisite System " a été utilisé pour insérer une nouvelle construction contenant la séquence HVA1, le promoteur double virus de la mosaïque du chou-fleur (CaMV) 2x35 S et le terminateur Nos dans un vecteur binaire pTF101.GW3. Le vecteur binaire généré pTFGat 101.11 contenant la construction de gène HVA1 a été ensuite introduit dans la souche A. tumefaciens EHA101. En utilisant le protocole de transformation basé sur l'organogenèse directe à partir des noeuds cotylédonaires, nous avons réussi à obtenir 2% des pousses transgéniques de fève qui intègrent la construction de HVA1. Cette intégration a été confirmée par PCR de gène marqueur bar.
N° de la microfiche : 041739
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